體內(nèi)樣品測定

　　考點(diǎn)1：常用測定方法

　　考點(diǎn)2：定量分析方法驗(yàn)證

　　1.特異性

　　內(nèi)源性物質(zhì)的干擾、代謝產(chǎn)物的干擾、同用藥物的干擾

　　要求：6個(gè)不同來源的空白體內(nèi)樣品色譜圖、空白體內(nèi)樣品外加標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖(注明濃度)及用藥后的體內(nèi)樣品色譜圖。

　　(體外分析的專屬性)

　　2.標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍

　　要求：用至少6個(gè)濃度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，應(yīng)使用與待測樣品相同的生物介質(zhì)，線性范圍要能覆蓋全部待測濃度，不允許將線性范圍外推求算未知樣品的濃度。隨行空白體內(nèi)樣品，但標(biāo)準(zhǔn)曲線不包括零點(diǎn)。(體外分析要求至少5個(gè)濃度)

　　3.定量下限

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線上的最低濃度點(diǎn)。S/N應(yīng)大于5。實(shí)際測定時(shí)，滿足3～5個(gè)半衰期濃度，或Cmax1/10～1/20。至少5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品測試結(jié)果證明。

　　(體外分析要求S/N=10)

　　4.精密度與準(zhǔn)確度

　　樣品選擇：選擇3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品同時(shí)進(jìn)行方法的精密度和準(zhǔn)確度考察。低濃度選擇在定量下限3倍以內(nèi)，高濃度接近于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限附近;中間選一個(gè)濃度。每一濃度每批至少測定5個(gè)樣品。

　　精密度：批內(nèi)精密度、批間精密度(不同天連續(xù)制備3個(gè)分析批)。用RSD表示，要求小于15%，在最低定量限附近小于20%。

　　準(zhǔn)確度：準(zhǔn)確度用相對回收率表示。一般應(yīng)在85%～115%范圍內(nèi)，在最低定量限附近應(yīng)在80%～120%范圍內(nèi)。(體外分析要求95-105%)

　　5.樣品穩(wěn)定性

　　表示一種分析物在確定條件下，一定時(shí)間內(nèi)在給定介質(zhì)中的化學(xué)穩(wěn)定性。

　　要求：根據(jù)具體情況，對含藥生物樣品(或儲備液、樣品處理液)在室溫、冰凍和凍融條件下以及不同存放時(shí)間進(jìn)行穩(wěn)定性考察。

　　6.提取回收率

　　分析過程的提取效率，能反映出樣品預(yù)處理過程中組分丟失的情況，是評價(jià)萃取方案優(yōu)劣的指標(biāo)之一。以樣品提取和處理過程前后分析物含量百分比表示。

　　要求：考察高、中、低3個(gè)濃度的提取回收率，其值一般應(yīng)一致，但重要的是重現(xiàn)性好。

　　7.質(zhì)控樣品

　　在生物介質(zhì)中加入已知量待測藥物所配制的樣品，用于質(zhì)量控制。

　　8.質(zhì)量控制

　　應(yīng)在生物樣品分析方法驗(yàn)證完成之后開始測試未知樣品，每個(gè)未知樣品一般測定一次，必要時(shí)可進(jìn)行復(fù)測。

　　每批生物樣品測定時(shí)應(yīng)建立新的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并平行測定高、中、低3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品。

　　質(zhì)控樣品測定結(jié)果的偏差一般應(yīng)小于15%。