體內(nèi)樣品測定

　　考點1：常用測定方法

　　考點2：定量分析方法驗證

　　1.特異性

　　內(nèi)源性物質(zhì)的干擾、代謝產(chǎn)物的干擾、同用藥物的干擾

　　要求：6個不同來源的空白體內(nèi)樣品色譜圖、空白體內(nèi)樣品外加標準物質(zhì)色譜圖(注明濃度)及用藥后的體內(nèi)樣品色譜圖。

　　(體外分析的專屬性)

　　2.標準曲線與線性范圍

　　要求：用至少6個濃度建立標準曲線，應使用與待測樣品相同的生物介質(zhì)，線性范圍要能覆蓋全部待測濃度，不允許將線性范圍外推求算未知樣品的濃度。隨行空白體內(nèi)樣品，但標準曲線不包括零點。(體外分析要求至少5個濃度)

　　3.定量下限

　　標準曲線上的最低濃度點。S/N應大于5。實際測定時，滿足3～5個半衰期濃度，或Cmax1/10～1/20。至少5個標準樣品測試結(jié)果證明。

　　(體外分析要求S/N=10)

　　4.精密度與準確度

　　樣品選擇：選擇3個濃度的質(zhì)控樣品同時進行方法的精密度和準確度考察。低濃度選擇在定量下限3倍以內(nèi)，高濃度接近于標準曲線的上限附近;中間選一個濃度。每一濃度每批至少測定5個樣品。

　　精密度：批內(nèi)精密度、批間精密度(不同天連續(xù)制備3個分析批)。用RSD表示，要求小于15%，在最低定量限附近小于20%。

　　準確度：準確度用相對回收率表示。一般應在85%～115%范圍內(nèi)，在最低定量限附近應在80%～120%范圍內(nèi)。(體外分析要求95-105%)

　　5.樣品穩(wěn)定性

　　表示一種分析物在確定條件下，一定時間內(nèi)在給定介質(zhì)中的化學穩(wěn)定性。

　　要求：根據(jù)具體情況，對含藥生物樣品(或儲備液、樣品處理液)在室溫、冰凍和凍融條件下以及不同存放時間進行穩(wěn)定性考察。

　　6.提取回收率

　　分析過程的提取效率，能反映出樣品預處理過程中組分丟失的情況，是評價萃取方案優(yōu)劣的指標之一。以樣品提取和處理過程前后分析物含量百分比表示。

　　要求：考察高、中、低3個濃度的提取回收率，其值一般應一致，但重要的是重現(xiàn)性好。

　　7.質(zhì)控樣品

　　在生物介質(zhì)中加入已知量待測藥物所配制的樣品，用于質(zhì)量控制。

　　8.質(zhì)量控制

　　應在生物樣品分析方法驗證完成之后開始測試未知樣品，每個未知樣品一般測定一次，必要時可進行復測。

　　每批生物樣品測定時應建立新的標準曲線，并平行測定高、中、低3個濃度的質(zhì)控樣品。

　　質(zhì)控樣品測定結(jié)果的偏差一般應小于15%。