檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號(hào),常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。
紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visible detector,UVD)
紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點(diǎn)是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測限可達(dá)1ng,檢測后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計(jì)相似,實(shí)際上就是裝有流動(dòng)地的紫外可見光度計(jì)。
(1)紫外吸收檢測器:
紫外吸收檢測器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長,并安裝一個(gè)光柵型單色器,其波長選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個(gè)流通池,一個(gè)作參比,一個(gè)作測量用,光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的均勻溶劑,則它們?cè)谧贤獠ㄩL下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強(qiáng)度相等,無信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測量池時(shí),吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等,這時(shí)有信號(hào)輸出,輸出信號(hào)大小與組分濃度有關(guān)。
局限:流動(dòng)相的選擇受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動(dòng)相,每種溶劑都有截止波長,當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時(shí),溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長
(2)光電二極管陣列檢測器(photodiode array detector, PDAD):
也稱快速掃描紫外可見分光檢測器,是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件,構(gòu)成多通道并行工作,同時(shí)檢測由光柵分光,再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號(hào),然后對(duì)二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù),得到吸收值(A)是保留時(shí)間(tR)和波長(&61548;)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時(shí)觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù),從而迅速?zèng)Q定具有選擇性和靈敏度的波長。
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